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绵羊寄生虫病的常用诊断方法

作者:第一论文网 更新时间:2015年10月30日 10:03:34

杨光

(朝阳市龙城区动物卫生监督所,辽宁朝阳122000)

[摘要] 寄生虫病对绵羊饲养业危害严重,主要表现在导致绵羊增质量缓慢、饲料报酬降低、免疫力下降、流产和繁殖障碍,还可引起绵羊急性发病大批死亡,严重影响绵羊饲养业的经济效益。因此,准确诊断寄生虫病对实际生产具有重要的意义。本文详细介绍绵羊寄生虫病的常用诊断方法。

[关键词] 绵羊;寄生虫病;诊断方法

[中图分类号] S858.26 [文献标识码] B [文章编号] 1674-7909(2017)25-72-2

1 临床诊断

1.1 流行病学调查

如果有疑似寄生虫病出现,首先应对当地绵羊寄生虫病的流行性进行调查,调查内容包括寄生虫的感染来源、感染途径、当地自然条件、中间宿主和传播媒介的存在与分布、动物种群的背景与现状资料以及防制措施与效果等,通过分析得出规律性结果,为临床诊断提供重要依据。人畜共患寄生虫病还要调查居民的卫生条件、饮食习惯、健康状况、发病情况等。

1.2 临床症状检查

临床症状检查主要是检查绵羊的营养状况、临床症状表现和疾病的危害程度。对于有寄生虫病典型症状的可以确诊;对发现病原体的一些外寄生虫病可以诊断;对于一些非典型寄生虫病,获得有关临诊资料,为下一步采取其他诊断方法提供依据。绵羊寄生虫病的临床症状检查,对同一圈舍的绵羊进行逐只检验必须以整群为单位,群体数量较大时,可随机抽查。在检验中如有疑似症状,可以进行实验室检查确诊。

1.3 寄生虫病理学剖检诊断

剖检是最常用且准确诊断寄生虫病的方法。剖检可用自然死亡的动物、急宰的患病动物或屠宰的动物。其在病理解剖的基础上进行,既要检查各器官的病理变化,又要检查各器官的寄生虫,并确定寄生虫的种类和数量,以便确诊。寄生虫学剖检还用于寄生虫的区系调查和动物驱虫效果评定。一般多采用全身各器官组织的全面系统检查,有时也根据需要检查一个或若干个器官。

1.4 药物诊断

药物诊断是通过对应特效药物对疑似寄生虫病患病动物进行打虫或诊治的方法,主要包括驱虫诊断和治疗诊断。驱虫诊断是指对疑似患病绵羊用对应的特效驱虫药驱虫,收集用药后3 d 以内的排泄物,眼观排泄物内的虫体,检查种类并确定数量,可以对寄生虫病进行确诊。该方法多用于对线虫病和绦虫病等消化道寄生虫的鉴别。治疗诊断是指对疑似患病绵羊用相应的药物进行诊治,用药后的效果可以作为诊断的依据。根据病畜的死亡、康复、好转等用药反应来判定诊治效果,该方法可以用于螨病、组织器官内蠕虫病及原虫的治疗诊断。

2 实验室诊断

实验室诊断是寄生虫病诊断中必不可少的手段,可为确诊提供重要的依据。一般在流行病学调查和临床症状检查的基础上进行,包括病原学诊断、免疫学诊断和其他实验室常规检查。

2.1 病原学诊断

按照不同寄生虫的习性不同,在绵羊的体液、粪便、排泄物或身体中发现活体寄生虫或正在发育阶段的寄生虫,如虫体、虫卵、幼虫、卵囊和包囊等。

寄生虫的检验方法主要有排泄物检查、皮肤组织及其刮下物检查、血液检查、尿液检查、生殖器官分泌物检查、肛周残留物检查、痰液及鼻腔液检查和淋巴液提取物检查等。通过以上方法无法检出的一些病原体引起的原虫病,可以用采集得病绵羊的病料进行实验动物接种,接种后待体内出现大量寄生虫后,再通过上述方法进行实验室检查,如弓形虫病等。

2.2 免疫学诊断

免疫学诊断是基于抗原、抗体特异性结合的原理,检测病原体免疫相关分子(抗原)或应用病原体抗原检测宿主免疫分子(抗体)以达到诊断目的,这是寄生虫病诊断有价值的方法,几乎用于诊断传染病的免疫学方法均可用于寄生虫病的诊断。

免疫荧光技术是基于免疫学、显微镜技术和生物化学建立起来的一种检测技术,是采取荧光标记的抗原或抗体同被检查物的抗体或抗原结合后,通过显微镜进行荧光检测,并分析检查样品的方法。本方法的优点是灵敏度高、特异性强,融合了显微技术的精准性和免疫检测的敏感性和特异性。主要包括直接免疫荧光技术(DFA)和间接免疫荧光技术(IFA)。

酶联免疫吸附试验(ELISA)是现在世界上通用的酶免疫测定方法。该方法通过酶的催化和底物放大反应来提高抗体-抗原的特异性反应灵敏度。此方法操作易自动化和标准化,特点是敏感度高、特异性强、简单易操作、成本低,可应用在流行病学调查的定量和定性检测上。

2.3 分子生物学诊断

DNA探针技术也被称为分子杂交技术,是基于高度精确的DNA分子的复性、变性和碱基互补配对的特点,针对不同寄生虫的DNA序列进行测定,将特异性进行比对。敏感性、特异性高是DNA探针技术的显著特点,试验方法便捷。目前,主要应用于阴道毛滴虫利什曼原虫病、贾第虫病、疟疾、弓形虫病等一些重要寄生虫病的鉴别诊断,还可用该方法进行虫株种、株鉴定等分类的相关研究。

PCR技术是一种对染色体或核糖体片段在体外进行扩增选择的技术,利用温度变化对模板进行引物、解链结合及延伸引物,与其他方法相比,PCR的特点是特异性和灵敏性较高。