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探究培养液中酵母菌种群数量的变化

作者:第一论文网 更新时间:2015年10月30日 10:03:34

 显微镜直接计数法在人教版必修3?稳态与环境?的“培养液中酵母菌种群数量变化”探究实验中有提及,但是关于如何计数与操作,教材并未做具体说明,如果教师不进行适当的补充,学生在学习时必然要受到困扰,学习效果将大打折扣.现将有关知识做以下简要补充.

1 实验原理

用液体培养基培养酵母菌,种群的增长受培养液的成分、空气、pH、温度等因素的影响.在理想的无限环境中,酵母菌种群呈“J”型增长;自然界中资源和空间总是有限的,酵母菌种群呈“S”型增长.计算酵母菌数量可用显微镜直接计数法.

2 实验步骤

实验步骤见图1.

3 计数方法和工具

计数方法为显微镜直接计数法,计数工具为血球计数板.

4 血球计数板使用方法简介

血球计数板是一块特制的载玻片,其上由4条槽构成3个平台;中间较宽的平台又被一短槽隔成两半,每1边的平台上各自刻有1个方格网,每个方格网共分为9个大格,中间的大方格即为计数室.血细胞计数板构造如图2所示.计数室的刻度一般有2种规格,一种是1个大方格分成25个中方格,而每个中方格又分成16个小方格;另一种是1个大方格分成16个中方格,而每个中方格又分成25个小方格,但无论是哪一种规格的计数板,每一个大方格中的小方格都是400个,如图3所示.每1个大方格边长为1mm,则每1个大方格的面积为1mm2,盖上盖玻片后,盖玻片与载玻片之间的高度为0.1mm,所以计数室的容积为0.1mm3.计数时,如果是一个大方格分成25个中方格,通常数5个中方格的总菌数,即共80个小格;如果是大方格分成16个中方格,通常数4个中方格的总菌数,即共100个小格,如图4所示.然后求得每个小方格的平均数,再乘上400,就得出1个大方格中的总菌数,再换算成1mL菌液中的总菌数.

设中方格内总菌数为A ,菌液稀释倍数为B,如果是25个中方格的计数板,则1mL 菌液的总菌数为:A ÷80×400×104×B;如果是16个中方格的计数板,则1mL菌液的总菌数为:A ÷100×400×104×B

5 跟踪训练

某生物兴趣小组开展探究实验,课题是“探究培养液中酵母菌种群数量与时间的变化关系”.实验材料和用具:菌种和无菌培养液、试管、血球计数板、滴管、显微镜等.实验步骤:将含有酵母菌的培养液滴在计数板上,计数1个小方格内的酵母菌数量,再以此为根据,估算试管中酵母菌总数.连续观察7天,并记录每天的数值.根据以上叙述回答下列问题:

(1)根据所学知识,该课题的实验假设是:开始一段时间,酵母菌呈“J”型增长,随着时间的推移,由于______,酵母菌呈“S”型增长.

(2)本实验没有另设置对照实验,原因是______.该实验是否需要重复实验? ______(填“是”或“否”).

(3)在吸取培养液计数前,要轻轻振荡几次试管,目的是______.如果一个小方格内酵母菌过多,难以数清,应当采取的措施是______.

(4)利用血球计数板可在显微镜下对酵母菌进行直接计数.每个计数室由400(25×16)个小室组成,容纳液体的总体积为0.1 mm3.现将1mL酵母菌样品中加入99mL无菌水稀释,用无菌吸管吸取少许样品滴在盖玻片边缘,使其自行渗入计数室,并用滤纸吸去多余菌液,如图5所示.

现观察到图中该计数室所示a、b、c、d、e5个中方格80个小室内共有酵母菌44个,则上述1mL酵母菌样品中约有酵母菌______个.为获得较为准确的数值,减少误差,你认为应采取的做法是______.

参考答案:(1)环境资源和空间有限.(2)该实验在时间上形成前后自身对照.(3)使酵母菌分布均匀;稀释菌液.(4)44÷80×400×100×10000=2.2×108;多取样、取平均值.